Imperial Protein Stain Kit
水溶性Coomassie R-250高感度ゲル染色
Imperial Protein Stain はSDS-PAGEゲルや二次元電気泳動ゲルでのタンパク質検出に使用するゲル染色用のクーマシー染色試薬です。水溶性Coomassie R-250を使用した独自の組成により、他のCBBゲル染色法と比較して大幅な感度向上を実現しました。また、要求される感度や染色時間によって変更可能な、シンプルかつ柔軟なプロトコルも特徴です。またメタノールや酢酸による固定や脱色も必要ありません。
特徴
- 検出下限 3ng/バンド の高感度検出
- 6ng/バンドであれば洗浄後20分間で検出できる迅速性
- MS分析やシーケンスに対応 (テクニカルリソースTR0050.0)
- 脱イオン水によるバックグランド脱色
- メタノール/酢酸による固定が不要
- 1液からなるReady-to-Useな試薬（室温保管）
図１．Imperial Protein Stainmのプロトコル
ゲルの洗浄
SDS-PAGE ： 50-100ml純水で3×5min.
（または200ml純水で15min.シェイク）
Native-PAGE ： 50-100ml純水で5min.
MOPS/MES系 ： 50-100ml純水で4×5min.
| 要求される感度 | 染色時間の目安 | 脱色時間の目安 |
| ≦ 3 ng | 2 hr | オーバーナイト |
| 3-6 ng | 1 hr | 1-2 hr |
| 6-12 ng | 5-10 min. | 3×5 min. |
図 2.Imperial Protein Stainの迅速性と感度 各タンパク質は Novex 4-20% Tris-Glycine Gelsを使用して分離し、5分間の染色と純水による3×5分間洗浄を行った。
Lane 1: BSA only (6 μg)
Lane 2: 1000 ng
Lane 3: 200 ng
Lane 4: 100 ng
Lane 5: 50 ng
Lane 6: 25 ng
Lane 7: 12 ng
Lane 8: 6 ng, Lane 9: 3 ng
* Lane 1のBSAは還元が不充分だったようです。
図 3.Imperial Protein Stain感度増強とバックグランド1時間までのImperial Protein Stain染色と1時間からオーバーナイトまでの純水洗浄を行うことで、さらなる感度向上とバックグランド軽減が可能となる。
Lane 1: BSA only (6 μg)
Lane 2: 1000 ng
Lane 3: 200 ng
Lane 4: 100 ng
Lane 5: 50 ng
Lane 6: 25 ng
Lane 7: 12 ng
Lane 8: 6 ng
Lane 9: 3 ng
図 4.A-431細胞核抽出物のImperial Protein StainとSimplyBlue SafeStainによる染色の比較Novex 4-20% Tris-Glycine Gelsによりタンパク質を分離した後、製造元の推奨プロトコルに従い染色(1時間)と純水による洗浄(2時間)に供した。
図 5.二次元電気泳動でのスポット強度の比較 生後6週間のSprague-Dawley ラットの心臓組織からのミトコンドリアタンパク質抽出物を調製した。処理済のタンパク質抽出物(72 μg)を pH 5-8 IPG strip により等電点電気泳動に供して、続いて 8-16% SDS-PAGEに供した。製造元の推奨プロトコルに従い、各ゲルを染色(1時間)と純水による洗浄(オーバーナイト)に供した。
| Cat.# | 製品名 | 容 量 | 価格 | MSDS |
| 24615 | Imperial Protein Stain 50 mini gels (8 cm x 10 cm)分 |
1 L | ¥20,500 | BID-P115 BID-P116 |
| 24617 | Imperial Protein Stain 150 mini gels (8 cm x 10 cm)分 |
3 x 1 L | ¥43,000 | BID-P115 BID-P116 |
