細胞溶出・タンパク質抽出
界面活性剤を利用した細胞溶解法は、実験再現性において物理的手法にくらべて優位な反面、サンプルごとにプロトコルを確立し、それぞれの試薬を自家調製する手間がかかります。Thermo Scientific Pierce のタンパク質抽出試薬シリーズでは各種細胞や組織に合わせて至適化した試薬をラインナップしています。
主要キット・試薬選択ガイド
| 製品名 | 細胞試料 | 透析による 除去 |
対応アプリケーション |
| B-PER Reagent | グラム陰性菌（H. pylori）、グラム陽性菌（S. aureus）、 大腸菌（BL21（D3）> JM109 > DH5α > M15）、 古細菌、線虫、Acinetobacter sp.、昆虫細胞 | 容易 | レポーターアッセイ、 免疫沈降、 ウェスタンブロッティング、 BCA Protein Assay（2-4倍希釈後）、 Pierce 660 nm Protein Assay（2倍希釈後） |
| Y-PER Reagent | 酵母（S. cerevisiae、 Schizo-saccharomyces pombe、C. albicans、P. pastoris）、 大腸菌、枯草菌、Strep. avidinii、 Acinetobacter sp. | 困難 | 免疫沈降、 ウェスタンブロッティング、 β-Galアッセイ、 等電点電気泳動（透析が必要）、GSTタグ・Hisタグ融合タンパク質の精製、 BCA Protein Assay（希釈不要） |
| Y-PER Plus Reagent | 酵母（S. cerevisiae）、 Acinetobacter sp. |
容易 | GSTタグ・Hisタグ融合タンパク質の精製、 ウェスタンブロッティング、 Coomassie Plus Assay（希釈不要） |
| P-PER Reagent | 植物組織（葉、根、茎、種） | 困難 | 1次元・2次元電気泳動、 免疫沈降、 ウェスタンブロッティング、Pierce 660 nm Protein Assay（2倍希釈後）、BCA Protein Assay Kit-Reducing Compatible （希釈不要） |
| I-PER Reagent | 昆虫細胞（Sf9、Sf21） | 困難 | Hisタグ融合タンパク質の精製、 ウェスタンブロッティング、BCA Protein Assay（希釈不要） |
| M-PER Reagent | 培養細胞（COS7、NIH3T3、CHO、Hepa 1-6、293、MDA、MB231、FM2）、 昆虫細胞 | 容易 | レポーターアッセイ、キナーゼアッセイ、 ELISA、ウェスタンブロッティング、BCA Protein Assay（希釈不要）、Coomassie Plus Assay（希釈不要）、Pierce 660 nm Protein Assay（2倍希釈後） |
| T-PER Reagent | 心臓組織、肝組織、 腎組織、脳組織 | 容易 | レポーターアッセイ、
キナーゼアッセイ、
ELISA、
ウェスタンブロッティング、
BCA Protein Assay（2倍希釈後）、 Coomassie Plus Assay（希釈不要）、 Pierce 660 nm Protein Assay（2倍希釈後） |
| NE-PER Reagent | 組織（子ウシ肝組織）、 培養細胞（HeLa、Cos7、NIH3T3、Hepa 1、C6） | 困難（CER） 容易（NER） |
EMSA（ 3 μLまたは10%以下で使用する場合、
または透析後*2）、
ウェスタンブロッティング、レポーターアッセイ、等電点電気泳動（透析による脱塩が必要）、2次元電気泳動*3、BCA Protein Assay（希釈不要）、Coomassie Plus Assay（細胞質画分は4倍希釈後）、 Pierce 660 nm Protein Assay（希釈不要） |
| Mem-PER Reagent | 培養細胞（C6、HeLa、NIH3T3）、 酵母（S. cerevisiae） | 容易*1 | ウェスタンブロッティング（純水で4倍希釈した試薬Bでサンプルを2-5倍希釈後、またはSDS-PAGE Sample Prep Kitによる界面活性剤除去後に（SDSPAGE）、2次元電気泳動*3、Pierce 660 nm Protein Assay（希釈不要） |
＊1 Mem-PER 試薬は透析可能ですが、膜タンパク質の不溶化を避けるため、透析液に0.5%の界面活性剤（CHAPS やOTG など）を含むバッファーを使用してください。
＊2 10-100 μL 溶液の透析には、Slide-A-Lyzer MINI Dialysis Unit が便利です。
＊3 2-D Sample Preparation for Membrane Proteins（製品コード89864）や2-D Sample Preparation for Nuclear Proteins（製品コード89863）は、タンパク質抽出後に、抽出サンプルを2次元電気泳動用に調製するためのキットです。
