Organelle Enrichment Kits
オルガネラ（リソソーム、ペルオキシソーム、核）を単離するためのキットシリーズ
組織または細胞を、キットに添付の試薬で溶解後、Iodixanol* 溶液で作成した密度勾配中で遠心分離します。リソソーム単離用、ペルオキシソーム単離用、核単離用の各キットをラインナップしており、それぞれ25 回分の試薬が含まれています。
特長
- 細胞溶解と密度勾配遠心によりインタクトなオルガネラを単離
- 単離後のサンプルは、2D/MS、電子顕微鏡解析、遺伝子発現解析などのアプリケーションに利用可能
| オルガネラ | サンプル | OptiPrep*密度勾配 | 遠心条件 Speed (x g) |
遠心条件 （分） |
| リソソーム | 細胞 | 15%, 17%, 20%, | 145,000 | 120 |
| 軟組織・硬組織 | 23%, 27%, 30% | |||
| ペルオキシソーム | 軟組織 | 27.5%, 30%, 35% | 180,000 | 90 |
| 硬組織 | 18%, 20%, 27.5% | 180,000 | 90 | |
| 核 | 軟組織・硬組織 | 7%, 23%, 27.5% | 40,000 | 90 |
* Axis-Shield 社のOptiPrep 試薬を利用しています。OptiPrep は60% Iodixanol 溶液です。
図 1. 培養細胞から単離したリソソームと細胞ライセート上清のウェスタンブロット
Lysosome Enrichment Kit for Tissue and Cultured Cellsを用いて、A431細胞およびHeLa細胞を溶解しました。細胞ライセートの上清は抗Lamp-1抗体または抗Cathepsin D抗体を用いたウェスタンブロッティングに使用しました。また細胞ライセートのペレットからキットの手順に従って密度勾配遠心を行いリソソームを単離しました。単離したリソソームは更に2% CHAPS in TBSで溶解し、抗Lamp-1抗体または抗Cathepsin D抗体を用いたウェスタンブロッティングに使用しました。リソソーム膜タンパク質であるLamp-1とリソソーム酵素であるCathepsin Dは、いずれも細胞ライセート上清にはほとんど検出されず、リソソームライセート中にメインバンドとして検出されました。
| Cat.# | 製品名 | 容 量 | 価格 |
| 89839 | Lysosome Enrichment Kit for Tissues and Cultured Cells Sufficient material for 25 applications |
Kit | ¥62,000 |
| Kit contains: Lysosome Enrichment Reagent A 90 ml Lysosome Enrichment Reagent B 90 ml Optiprep Cell Separation Media 50 ml BupH Phosphate Buffered Saline 1 pack |
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| 89840 | Peroxisome Enrichment Kit for Tissue Sufficient material for 25 applications |
Kit | ¥62,000 |
| Kit contains:
Peroxisome Enrichment Reagent A 90 ml Peroxisome Enrichment Reagent B 90 ml Optiprep Cell Separation Media 50 ml BupH Phosphate Buffered Saline 1 pack |
|||
| 89841 | Nuclei Enrichment Kit for Tissue
Sufficient material for 25 applications |
Kit | ¥62,000 |
| Kit contains:
Nuclei Enrichment Reagent A 90 ml Nuclei Enrichment Reagent B 90 ml Optiprep Cell Separation Media 50 ml BupH Phosphate Buffered Saline 1 pack |
