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ExcelArrayテクノロジーについて

サンドイッチ マイクロアレイ スライド

エクセルアレイは抗体サンドイッチマイクロアレイです。サンドイッチELISA法と同様の簡単なプロトコルにより16検体の12サイトカインを1枚のスライドで定量することが出来ます。 各スライドの16ウェル(サブアレイ)には特異抗体・陰性コントロール・陽性コントロールがトリプリケートされてスポットされています。検出には一般的な蛍光スライドリーダーに対応するサーモフィッシャーサイエンティフィック ピアスブランドDyLight649蛍光標識ストレプトアビジンを使用、スライドには蛍光バックグランドの低い超薄ニトロセルロースコーティングの PATH plus protein microarray slide が使用されています。他のシラン化スライドやニトロセルロースパッドスライドと比較しても広いダイナミックレンジ、高いシグナルノイズ比、優れた再現性が実感できるはずです。

製品特徴

  • NIBSC(*)標準品に対して校正
    (* National Institute for Biological Standard and Control)
  • 天然試料でバリデーション済み
  • シンプルなサンドイッチELISA
  • 定量的
  • ピコグラム低域の感度
  • 一般的なスライドスキャナーに対応

Excel Array Fig.1

図1. ExcelArray Human Inflammation I Array Kit slide array レイアウト 中央は検量線上の濃度 1000 pg/ml 標準品での擬似カラー(オーバーレイ画像

キット内容物

  • アレイスライド2枚
  • アレイサンプル希釈液 (1X) 2x10 ml
  • 凍結乾燥 標準品, 2 本
  • 凍結乾燥 検出抗体, 2 本
  • 凍結乾燥 DyLight 649 蛍光標識ストレプトアビジン, 2 本
  • 洗浄バッファー (30X), 2X 200 ml
  • リンス液 (5X), 2X 10 ml
  • スクリューキャップ付きスライドコンテナー, 2コ

Excel Array Fig.2

図 2. ExcelArray Human Inflammation I Array Kitによる6点標準曲線の3次元棒グラフ 16ウェル(サブアレイ)スライドで標準に6点を使用した場合、未知試料は10点測定できる

excelarray about #3

excelarray about #4

pg/ml
IFNg
pg/ml
IL-1β
pg/ml
IL-2
pg/ml
IL-4
pg/ml
IL-6
pg/ml
IL-8
pg/ml
IL-10
pg/ml
IL-12
pg/ml
TNFα
pg/ml
MIP-1β
pg/ml
MIP-1β
pg/ml
RANTES
--- 刺 激 ---
199 1149 99 137 7590 >10000 174 100 915 >10000 >50 4975
--- 未 刺 激 ---
<10 10 <10 27 <10 <10 <10 <10 <10 27 <10 144

図 3. PBMCs (末梢血単核球) を単離して PHA (分裂促進因子) により刺激した。細胞培養上清をPHA未刺激細胞とPHA刺激細胞から回収して ExcelArray Human Inflammation I Array Kit で試験した。試験後のスライドは Alpha Inotech AlphaScan slide reader でスキャンして ArrayVision software により解析した

Novagen
Proteoplex Cytokine
Array Kit
Whatman
S&S FAST Quant®
Th1/Th2 Kit
ExcelArray
Human Inflammation I
Array Kit
分析対象 12/12 7/9 12/12
平均検出感度 2.2 pg/ml 11 pg/ml 2.1 pg/ml
平均シグナルノイズ比 43 95 70
天然試料による試験
(バリデーション)
11/12 analytes
(IL-4 not tested)
6/9 analytes
(IL-4 not tested)
12/12 analytes
(all verified)
NIBSC標準品による校正 No No Yes
添加回収率
(細胞培養上清)
Not Evaluated Not Evaluated 102% (average)
84 to 110% (range)
添加回収率
(血清)
Not Evaluated 60% (average)
35 to 73% (range)
111% (average)
87 to 128% (range)
スライド数 1 4 2

S&S Kit does not include Sample Diluent, FAST Frame holder, or the streptavidin-fluorophore (they recommend Cy5-Streptavidin).

Cat.# 製品名 容 量 参考価格
82003 ExcelArray Human Inflammation II Array Kit Kit 販売終了
82004 ExcelArray Human Angiogenesis Array Kit Kit 販売終了
82006 ExcelArray Human Kemotaxis Array Kit 販売終了