HisProbe-HRP Reagent and Kit

Hisタグ融合タンパク質の化学発光検出キット

HRPと活性型型誘導体は特定の金属に親和性を示す分子の検出に使用されます。HisProbe-HRPはニッケル(Ni2+)により活性化されたホースラディッシュペルオキシダーゼ(HRP)誘導体です。本製品はHisタグ付き組替え型タンパク質やその他のヒスチジンリッチなタンパク質の直接検出に最適化されており、anti-6xHis抗体と違い、HisProbeは隣接するタグに影響を受けずポリヒスチジンタグを認識できます。

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図1HisProbe-HRPの反応原理

製品特長:

  • 迅速 – Hisタグ検出は検出プローブとのワンステップの反応で行われ、1次抗体や2次抗体との2ステップでの長時間の反応が不要
  • 経済的 - 高価な1次抗体や2次抗体の購入も不要
  • 高い特異性 – HisProbe-HRPは隣接するタグに影響を受けずポリヒスチジンタグを認識
  • 低い立体障害 – 低分子のHisProbe-HRPは、組み換えタンパク質の立体障害によって従来のHisタグ抗体で検出できなかったHisタグ融合タンパク質を検出（タンパク質によっては検出できない場合もあります）

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図 2 Hisタグ融合タンパク質の検出法の比較
パネルA; HisProbe-HRPを使用して３つのHisタグ融合タンパク質と特異的に結合、低いバックグラウンドノイズが確認された 。　パネルB; anti-6xhis抗体を使用。 ３つのうち２つが未検出であり、明らかなバックグランドノイズが確認された。

参考文献

  1. Segawa H., et al. Reconstitution of GDP-mannose Transport Activity with Purified Leishmania LPG2 Protein in Liposomes, J. Biol. Chem., Jan 2005; 280: 2028 – 2035.
  2. Adler J. and Bibi E. Determinants of Substrate Recognition by the Escherichia coli Multidrug Transporter MdfA Identified on Both Sides of the Membrane, J. Biol. Chem., Mar 2004; 279: 8957 – 8965
  3. Adler J. and Bibi E., Promiscuity in the Geometry of Electrostatic Interactions between the Escherichia coli Multidrug Resistance Transporter MdfA and Cationic Substrates. J. Biol. Chem., Jan 2005; 280: 2721 – 2729
  4. Wagner C. et al. Dimerization of NO-sensitive guanylyl cyclase requires the alpha1 N terminus. J. Biol. Chem., Mar 2005
  5. Sundberg-Smith L., et al. Adhesion Stimulates Direct PAK1/ERK2 Association and Leads to ERK-dependent PAK1 Thr 212 Phosphorylation. J. Biol. Chem., Jan 2005; 280: 2055 – 2064.

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  • SwellGel Nickel Chelated Discs
製品情報
Cat# 製　品　名 容 量 参考価格 MSDS
15165 HisProbe-HRP 2 mg ¥32,000 BID-P302
15168 SuperSignal West HisProbe Kit Kit ¥76,000 BID-P020
BID-P302
HisProbe-HRP 2 mg 2 mg
SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrate* 500 ml
Blocker BSA in TBS (10X) 1 x 125 ml
BupH Tris Buffered Saline 10 x 500 ml
Surfact-Amps 20 (10%) 6 x 10 ml ampules

*SuperSignal Technology is protected by U.S. Patent #6,432,662.